《民國日報》的主要內容和立場幾經變遷，大致可分為三個階段：創刊之初(1916-1917年)：反對北洋軍閥；國共合作時(1923-1927年1月)：成為改組後國民黨的機關報，積極宣傳革命，後期(1927-1932年)背離孫中山的三大政策，成為南京政府的宣傳工具；抗戰勝利後復刊時期(1945-1947年)：新聞、言論均按宣傳指示處理，已無法再與前期相比。

《民國日報》副刊《覺悟》是五四時期的四大副刊之一，主要內容涉及新文化運動、教育、科學、文學、社會各種問題的討論，並刊有詩歌、小說等。積極宣傳社會主義思想，密切關注社會現實問題，推動了新文化運動的發展，是“中國早期傳播馬克思主義各種刊物中，影響最大的一家副刊”。
 
“覺悟”副刊上的兩類內容值得注意：一類是介紹新思潮，宣傳馬克思主義和社會主義的文章；例如“覺悟”副刊長期連載過恩格斯的《空想及科學的社會主義》、列寧的《馬克思政治學》（即《國家與革命》）、邵力子的《提倡社會主義絕不是好奇》；另一類是刊登青年人普遍感興趣的討論求學、反對包辦婚姻、自由戀愛等問題的文章。比如宣傳婦女解放和節制生育的《俄國婚姻律》等文章。
 
另外，《民國日報》亦是中國近代著名革命文學團體南社的重要文學陣地。透過該報可以完整瞭解南社從發展、衰落直至結束的過程，對新舊文學轉型、文學的生產和傳播、中西文化交流等領域具有重要意義。

上海圖書館《全國報刊索引》完成《民國日報》數位化110,000版，完整收錄《民國日報》從創刊至終刊的所有版面。

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